一、细胞基本属性
细胞名称:DAUDI人Burkitt's淋巴瘤细胞
细胞别称:DAUDI细胞;人B淋巴细胞瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:31岁男性(原代取材于Burkitt's淋巴瘤患者外周血)
组织来源:外周血单核细胞(EB病毒阳性转化)
生长特性:悬浮生长(可形成细胞团簇)
细胞形态:圆形或类圆形,单细胞或松散团状悬浮
细胞代数:P5 - P15(建议使用代数区间以维持遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含10% DMSO的完全培养基, -150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与细胞密度及培养条件相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体外诊断试剂开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:直接置于培养箱静置30分钟,轻柔混匀后分瓶
传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL(建议每2 - 3天传代)
传代比例:按1:3至1:5稀释(维持终浓度2×10⁵ cells/mL)
消化方法:悬浮细胞无需酶消化,直接离心后重悬分瓶
注意事项:
避免长时间静置导致细胞过度聚集
培养基需每48小时补充新鲜配制的10% FBS
建议每3代进行支原体检测(PCR法)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:完全培养基+10% DMSO(现用现配)
细胞密度:冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞,重悬于冻存液
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后12小时台盼蓝染色存活率≥90%
功能验证:CCK - 8检测P5代细胞应保持对数增殖活性
表面标志物检测:持续表达CD19/CD20等B细胞标记
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供温度记录截图)
2. 72小时内证实支原体污染(需提供电泳检测结果)
3. 复苏存活率低于85%(规范操作前提下)
4. STR分型与数据库不一致
不予重发情形:
1. 收到细胞后超72小时未进行复苏操作
2. 自行更换无血清或低血清培养基导致细胞凋亡
3. 未定期检测支原体引发实验室污染扩散
4. 未按悬浮细胞特性进行震荡培养导致异常聚集