一、细胞基本属性
- 细胞名称：D283 Med人脑髓母细胞瘤细胞
- 细胞别称：髓母细胞瘤细胞系；D283Med
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：4岁男性（原发灶为小脑髓母细胞瘤，转移至软脑膜）
- 组织来源：脑部髓母细胞瘤组织
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则多角形，偶见伪足延伸
- 细胞代数：P5 - P10（推荐使用代数，确保增殖稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS + 1%非必需氨基酸+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（受血清批次及接种密度影响）
- 供应限制：仅限于肿瘤机制研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管为37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶为表面消毒后直接置于CO₂培养箱静置4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（过度融合易导致自发分化）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含0.02%胶原酶），37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至单细胞悬液
- 注意事项：传代后48小时内避免频繁观察（减少环境扰动）；培养基需预温至37℃，防止温度骤变诱发细胞应激
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO + 20% FBS + 72%基础培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：对数生长期细胞经消化离心后重悬于冻存液；程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证：复苏后72小时检测细胞贴壁率（应≥85%）；功能验证：CCK - 8法检测增殖曲线（P5代细胞应保持高增殖活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）；到货7日内证实真菌/支原体污染（需第三方检测报告）；细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供台盼蓝染色视频）；STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败；擅自更换培养基引发细胞状态异常；未按规范进行传代导致自发分化；液氮保存中断超过24小时
