一、细胞基本属性
- 细胞名称:COLO320 HSR人结直肠腺癌细胞
- 细胞别称:COLO 320HSR;结直肠腺癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:结直肠腺癌患者(原代样本来源信息保密)
- 组织来源:结直肠腺癌组织
- 生长特性:贴壁与悬浮混合生长(部分细胞呈现半贴壁特性)
- 细胞形态:异质性明显,贴壁细胞呈梭形或多角形,悬浮细胞呈类圆形
- 细胞代数:P5 - P15(建议传代次数不超过20代以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代物), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(与培养基成分及细胞密度相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:贴壁细胞融合度达80% - 90%或悬浮细胞密度达1×10^6 cells/mL
- 传代比例:1:3至1:4(贴壁细胞需消化分离,悬浮细胞直接稀释)
- 消化方法:
- 贴壁细胞使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 悬浮细胞需保留部分旧培养基维持细胞适应性
- 定期检测支原体污染(建议每三个月进行一次PCR检测)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及20%血清替代物)
- 细胞密度:贴壁细胞1×10^6 cells/mL,悬浮细胞2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 贴壁细胞需消化后离心收集,悬浮细胞直接离心浓缩
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内检测存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P10代细胞应维持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控截图)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色原始图像)
- STR分型与数据库不匹配(需提供完整电泳图谱)
- 不予重发情形:
- 未使用指定培养基导致细胞形态异常
- 细胞传代次数超过推荐范围引发遗传漂变
- 未按规范进行梯度冻存导致冰晶损伤
- 实验操作污染未及时反馈(收货后超7天提出异议)