一、细胞基本属性
细胞名称:COLO205人结肠癌细胞
细胞别称:人结肠腺癌细胞;结肠癌上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年男性(源自结肠腺癌患者原代组织)
组织来源:结肠腺癌组织
生长特性:贴壁生长(可呈现半贴壁/悬浮聚集现象)
细胞形态:上皮样多角形,核质比高,成片生长时呈铺路石状排列
细胞代数:P15 - P25(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO及20% FBS), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 60小时(受培养基批次及接种密度影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于培养箱,24小时后首次换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁细胞需及时传代防止脱落)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 半贴壁细胞需离心去除死细胞后再接种
- 培养液中可添加0.1mM β - 巯基乙醇提升细胞活力
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P20代细胞应维持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
2. 到货7日内经PCR证实支原体污染
3. STR位点匹配率低于85%
4. 复苏后细胞贴壁率低于50%
不予重发情形:
1. 使用无血清培养基或未按要求添加生长因子
2. 培养箱CO₂浓度长期偏离设定范围(>7%或<3%)
3. 未定期进行支原体检测导致污染扩散
4. 细胞传代超过推荐代数(P25)后出现异常