一、细胞基本属性
- 细胞名称:CFPAC-1人胰腺癌细胞
- 细胞别称:CFPAC1;胰腺导管腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:38岁女性(源自转移性胰腺癌患者肝转移灶)
- 组织来源:胰腺导管腺癌组织(原发灶伴肝转移)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则上皮样,单层贴壁时呈梭形或多角形,高密度时可见重叠生长
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以确保基因表达稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%丙酮酸钠+10mM HEPES缓冲液)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞膜稳定剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约48 - 60小时(依赖传代密度及血清批次)
- 供应限制:仅限基础研究使用,禁止临床治疗或转基因动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻≤2分钟,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐3天传代周期)
- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化液
- 注意事项:
- 传代后需补充2mM L -谷氨酰胺增强贴壁能力
- 避免频繁观察扰动(影响贴壁效率)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集对数生长期细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测活力(台盼蓝拒染率≥85%)
- 功能验证:CA19 - 9分泌量检测(P10代细胞应维持>50U/mL)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输箱温度记录仪显示≥ - 130℃超过2小时
- 到货7日内经qPCR证实支原体污染
- 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色视频)
- STR分型与ATCC数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 未使用胶原蛋白包被培养器皿导致贴壁失败
- 自行修改培养基配方引发细胞分化
- 未按时传代导致细胞老化(代次>P20)
- 实验记录缺失无法追溯操作细节