一、细胞基本属性
- 细胞名称:CEM/C1人急性淋巴细胞白血病细胞
- 细胞别称:CEM - C1;CEM C1;急性T淋巴细胞白血病细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自急性T淋巴细胞白血病患者外周血(女性,4岁)
- 组织来源:外周血淋巴细胞
- 生长特性:悬浮聚团生长(部分贴壁细胞需轻吹打散)
- 细胞形态:圆形或类圆形,透亮胞质,核质比高
- 细胞代数:P15 - P25(推荐使用代数,维持肿瘤特性稳定)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含10% DMSO的胎牛血清冻存液,-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(与传代密度及血清批次相关)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究与药物筛选,禁止临床应用
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:静置培养箱30分钟后轻柔混匀悬浮细胞
- 传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(维持密度2×10⁵ - 8×10⁵ cells/mL)
- 换液频率:每48小时半量换液(保留半数原培养基维持代谢平衡)
- 注意事项:
- 离心速度不超过300×g(防止细胞膜损伤)
- 贴壁细胞占比>10%时需用细胞筛去除(维持悬浮特性)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含90%胎牛血清+10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 对数生长期收集细胞,离心后重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能性验证:CCK - 8检测72小时增殖曲线(与ATCC数据比对)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输超48小时导致活率<85%
- 72小时内证实支原体污染(需提供电镜或PCR报告)
- STR分型与ATCC标准数据库偏差>15%
- 不予重发情形:
- 使用含β - 巯基乙醇培养基导致细胞毒性
- 未按规范离心致细胞膜破裂
- 长期过度稀释培养(密度<1×10⁵ cells/mL持续72h)
- 未定期进行CD3/CD7表面标志物鉴定