一、细胞基本属性
- 细胞名称:CCRF - CEM人急性淋巴细胞白血病细胞
- 细胞别称:CEM细胞系;T淋巴细胞白血病细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:儿童患者(原代取材自外周血)
- 组织来源:外周血急性T淋巴细胞白血病样本
- 生长特性:悬浮生长(形成松散细胞团)
- 细胞形态:圆形或类圆形,胞体透亮,呈单个或小簇状分布
- 细胞代数:P5 - P15(建议控制代次以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含血清型冻存液)
- 培养基:RPMI 1640基础培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(与培养密度及传代操作相关)
- 供应限制:仅限肿瘤研究及药物筛选用途,禁止临床应用
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精擦拭外壁后直接置于培养箱,静置4小时后观察密度。
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐维持密度2×10^5-8×10^5 cells/mL)
- 操作方法:
- 无需消化,直接离心收集细胞(200×g,5分钟)。
- 重悬后按比例接种至新鲜培养基。
- 注意事项:
- 避免离心速度过高导致细胞膜损伤。
- 定期检测支原体污染(建议每3代检测一次)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(10% DMSO+90%胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10^6-5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:CD3/CD7表面标志物流式检测(阳性率需>95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度偏离导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 到货48小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测图像)。
- STR分型与数据库记录不一致(需提供第三方检测报告)。
- 不予重发情形:
- 使用非推荐培养基(如贴壁细胞专用培养基)。
- 未按时传代导致细胞过度堆积死亡。
- 未执行标准复苏流程(如直接室温解冻)。
- 实验操作污染导致交叉感染。