一、细胞基本属性
细胞名称
Caki - 1人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
细胞别称
Caki - 1细胞;肾透明细胞癌皮肤转移细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
肾透明细胞癌皮肤转移灶
生长特性
贴壁生长(依赖细胞间接触抑制)
细胞形态
上皮样,贴壁紧密,单层铺展后呈多边形
细胞代数
P4 - P10(建议使用代数以保证遗传稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
McCoy's 5A培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(具体视培养密度及营养条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱内2小时平衡后换液
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度为3×10^4 cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
- 避免消化过度(防止细胞膜损伤)
- 传代后12 - 24小时更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法,存活率≥90%)
- 功能验证:细胞增殖实验(P5代细胞应保持稳定生长曲线)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供干冰余量证明)
2. 收到后3天内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)
4. STR鉴定结果与存档不符
不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过72小时
2. 使用非推荐培养基或血清导致状态异常
3. 操作不当导致反复冻融损伤
4. 未按规范检测支原体直接进行实验