一、细胞基本属性
细胞名称:CAOV-3人卵巢腺癌细胞
细胞别称:CAOV3;卵巢腺癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:卵巢腺癌组织(原代分离自56岁女性患者)
生长特性:贴壁生长(依赖细胞 - 基质黏附)
细胞形态:上皮样,单层铺展呈不规则多边形,核质比高
细胞代数:P5 - P10(确保遗传稳定性与功能一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-150℃以下)
倍增时间:约48 - 60小时(受培养密度及传代操作影响)
供应限制:仅用于科学研究,禁止临床治疗、药物生产或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基离心重悬
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于37℃培养箱平衡2小时
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代)
传代比例:1:3至1:6(推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
注意事项:
- 避免消化过度(防止细胞膜损伤及功能蛋白丢失)
- 首次换液需在贴壁后12小时内完成,去除残余碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P5代细胞应保持指数生长期活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(经我方实验室复测确认)
4. STR基因分型与存档数据不符
不予重发情形:
1. 客户未按规范操作导致细胞污染或死亡
2. 使用非指定培养基或添加剂影响细胞状态
3. 未在液氮中保存导致的反复冻融损伤
4. 超过建议传代次数引发的功能异常
(注:以上内容基于标准操作流程,具体实验条件建议根据研究目的优化)