一、细胞基本属性
细胞名称
Calu - 1人肺癌细胞(Human Lung Adenocarcinoma Cells)
细胞别称
Calu - 1;肺腺癌细胞系
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
肺腺癌组织(源自25岁白人男性患者)
生长特性
贴壁生长(偶见半贴壁悬浮现象)
细胞形态
上皮样多角形,单层排列呈“铺路石”样结构
细胞代数
P5 - P15(建议使用低代数以维持遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基
RPMI - 1640(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
程序降温冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间
~24 - 48小时(依赖传代密度及血清批次)
供应限制
仅用于科学研究,禁止临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴解冻后离心去除冻存液,加入5mL预热培养基重悬
• 培养瓶:酒精擦拭表面,静置于培养箱4小时稳定微环境
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(贴壁细胞需密切观察半悬浮细胞比例)
传代比例
1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
• 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 贴壁不牢时适当降低胰酶浓度
• 传代后6小时需首次换液以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
• 梯度降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
• 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
• 功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线(P8代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)
2. 到货72小时内证实交叉污染(需提供STR鉴定报告)
3. 细胞复苏贴壁率低于80%(需提供明场显微镜影像)
不予重发情形
1. 未按规范预热培养基直接解冻细胞
2. 使用非标准培养容器导致气体交换异常
3. 未定期进行支原体检测引发污染扩散
4. 未保留传代记录影响问题溯源