一、细胞基本属性
- 细胞名称：Caco - 2人结肠腺癌细胞
- 细胞别称：Caco - 2细胞；结肠腺癌细胞；人结直肠癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：72岁男性结肠腺癌患者（供体信息经医学伦理审查）
- 组织来源：结肠腺癌组织原代分离
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样多角形，高密度时可形成多层结构
- 细胞代数：P15 - P25（推荐使用代数，确保分化特性稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含20% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（受分化状态及培养条件影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，置于培养箱静置4小时后再更换培养基
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（分化阶段需控制传代频率）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化5 - 10分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项：
- 分化实验需延长培养时间至21天（形成致密单层屏障）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化收集细胞，离心后重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→转入液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色法≥90%）
- 功能验证：跨膜电阻检测（TEER值需符合分化模型标准）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 细胞复苏后存活率低于85%
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形：
- 未按规范进行细胞分化培养（如频繁传代影响屏障形成）
- 使用非指定培养基导致细胞形态异常
- 液氮保存设备故障导致的反复冻融
- 未按要求进行定期支原体检测
