一、细胞基本属性
- 细胞名称:BT-549人乳腺导管癌细胞
- 细胞别称:BT-549细胞;乳腺导管癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自女性乳腺导管癌组织,具有浸润性导管癌特征
- 组织来源:乳腺导管癌组织(原发肿瘤位点)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,不规则多角形,核质比高
- 细胞代数:P4 - P10(建议使用P8代以内确保表型稳定)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10%胎牛血清+1%胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(依赖传代密度与血清浓度)
- 供应限制:仅用于体外研究,禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,离心去冻存液后加5mL预热培养基重悬
- 培养瓶:酒精消毒外表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,加血清终止
- 注意事项:
- 避免单层过度致密(易触发分化或衰老)
- 传代后需胶原蛋白重新包被培养皿
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO+20%胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 转入液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
- 表型验证:免疫荧光检测上皮标志物(CK18阳性表达率需≥90%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 收到后48小时内证实真菌/细菌污染(需提供污染检测证据)
- 复苏后贴壁率低于80%(需提供显微镜观察记录)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 使用非推荐包被材料导致细胞脱落
- 未按时传代引发细胞分化或衰老
- 自行修改培养基成分导致增殖异常
- 未执行标准复苏流程(如直接室温解冻)