一、细胞基本属性
细胞名称：人乳腺导管癌细胞（Human Breast Ductal Carcinoma Cells）
细胞别称：BT - 474；乳腺导管癌细胞；乳腺癌细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
疾病背景：浸润性导管癌（源自乳腺癌患者原发肿瘤组织）
组织来源：乳腺导管癌组织
生长特性：贴壁生长（需基质胶包被培养器皿以增强贴附）
细胞形态：上皮样多角形，核质比高，成簇生长
细胞代数：P5 - P15（建议控制传代次数以维持基因稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清型冻存液）
培养基：RPMI - 1640培养基（含10%FBS+10μg/mL胰岛素+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：含10% DMSO的完全培养基，液氮长期保存
倍增时间：~72 - 96小时（受激素敏感性影响）
供应限制：研究用途，禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置4小时后更换新鲜培养基
传代标准：融合度达80% - 90%（过密易导致细胞脱落）
传代比例：1:3至1:4（推荐使用胶原酶消化系统）
消化方法：
- 0.25%胰酶 - EDTA配合细胞刮轻柔处理
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲
注意事项：
- 需定期添加表皮生长因子（EGF）维持增殖活性
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：基础培养基+20%FBS+10% DMSO
细胞密度：冻存浓度1×10^6 cells/mL
冻存步骤：
- 预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后梯度降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：HER2/neu受体表达检测（免疫荧光法）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输期间温度异常（需提供温度记录仪数据）
2. 到货72小时内经检测存在交叉污染（需STR报告）
3. 细胞复苏存活率低于80%（需提供染色检测视频）
4. 激素响应功能缺失（需提供雌激素刺激增殖实验数据）
不予重发情形：
1. 使用非推荐消化酶导致细胞膜损伤
2. 未定期进行支原体检测引发污染扩散
3. 长时间高密度培养诱发基因不稳定性
4. 未佩戴无菌手套操作造成真菌污染
（注：所有操作需在二级生物安全柜中完成，该细胞系具有成瘤性，实验废弃物需经高压灭菌处理）
