一、细胞基本属性
细胞名称:人膀胱癌细胞(Human Bladder Cancer Cells)
细胞别称:BIU - 87;膀胱移行细胞癌;尿路上皮癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年男性(原代取自膀胱癌组织样本)
组织来源:膀胱移行上皮癌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,可见伪足延伸
细胞代数:P4 - P10(推荐使用代数内确保基因稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%青霉素 - 链霉素
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养基批次相关)
供应限制:仅供体外研究使用,禁止活体移植或诊断用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴解冻后,1500rpm离心3分钟去除冻存液
• 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱
传代标准:融合度达80% - 90%(贴壁细胞呈致密单层)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
• 消化终止需添加含血清培养基(比例≥1:1)
• 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90%胎牛血清+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
• 细胞悬液与冻存液按1:1混合
• 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期存储
复苏验证:
• 复苏后48小时观察贴壁率(应>85%)
• 功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线(P5代倍增时间≤50h)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 液氮运输罐真空失效导致细胞失活(需提供温度记录)
2. 到货7天内经检测存在交叉污染(需提供STR图谱)
3. 复苏后贴壁率低于80%(需提供明场显微照片)
不予重发情形:
1. 未使用胶原蛋白包被培养器皿
2. 擅自添加非推荐生长因子影响细胞特性
3. 培养环境中CO₂浓度超过8%
4. 未按规范进行定期支原体检测