一、细胞基本属性
细胞名称:BJ人皮肤成纤维细胞(BJ Human Dermal Fibroblasts)
细胞别称:BJ-1细胞;皮肤成纤维细胞;BJ细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:新生儿(男性,供体筛选无遗传病史)
组织来源:包皮组织原代分离
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或明胶包被培养器皿)
细胞形态:长梭形,单层呈放射状或漩涡状排列
细胞代数:P3 - P8(推荐使用中低代次保持功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%非必需氨基酸+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖血清浓度与培养密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴轻摇解冻,加5mL完全培养基离心去冻存液
培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱,4小时后首次换液
传代标准:细胞融合度达90% - 95%(建议每周传代1 - 2次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.1%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化酶
注意事项:
避免频繁观察扰动细胞贴壁过程
每周补充2mM抗坏血酸以促进胶原合成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:完全培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
消化离心后重悬于预冷冻存液
程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
功能验证:Ⅰ型胶原分泌量检测(P5代细胞需维持≥2μg/10⁶ cells/24h)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录仪显示超温≥10分钟(需提供原始数据)
2. 到货7天内证实真菌污染(需提供镜检图像)
3. 细胞增殖速率低于标准20%(需提供连续3天计数记录)
4. STR分型与ATCC数据库不一致
不予重发情形:
1. 未使用推荐包被材料导致细胞脱落
2. 自行改良培养基后出现形态变异
3. 实验性基因编辑导致功能异常
4. 未按要求进行定期支原体预防处理