一、细胞基本属性
- 细胞名称：Bel - 7405人肝癌细胞
- 细胞别称：Bel7405；BEL - 7405；人肝癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自52岁男性原发性肝癌患者的癌组织
- 组织来源：肝脏肿瘤组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胰酶消化传代）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁呈铺路石状排列
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，保证功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存（-196℃）
- 倍增时间：~36 - 48小时（受培养密度与血清批次影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗、药物生产或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置2小时后观察贴壁情况
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项
- 避免消化过度（导致细胞膜完整性受损）
- 传代后6 - 8小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬细胞于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：CCK - 8增殖实验（P8代细胞应维持典型生长曲线）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供无菌检测报告）
- 复苏后细胞存活率低于85%（需提供台盼蓝染色视频）
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 客户未及时复苏导致细胞活性丧失
- 自行修改培养基成分引发细胞状态异常
- 非规范冻存操作导致的细胞损伤
- 未按要求进行定期支原体检测
