一、细胞基本属性
- 细胞名称:BALL - 1人B淋巴细胞白血病细胞
- 细胞别称:BALL - 1细胞;人急性B淋巴细胞白血病细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年患者(临床病例来源,性别信息未公开)
- 组织来源:B淋巴细胞白血病患者外周血或骨髓
- 生长特性:悬浮生长(聚集成团或单个细胞形式存在)
- 细胞形态:圆形或类圆形,胞体透亮,核质比高
- 细胞代数:P5 - P15(建议控制代数以保证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10 - 15%FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(与细胞密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药产品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:直接置于培养箱中静置,避免剧烈摇晃
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(维持密度在2×10^5 - 1×10^6 cells/mL)
- 传代方法
- 无需消化,直接离心收集细胞后按比例稀释接种
- 补充新鲜培养基至原体积
- 注意事项
- 避免过度离心(推荐200×g,5分钟)
- 定期检测支原体污染(悬浮细胞易交叉污染)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时内台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:CD19/CD20表面标志物流式检测(P8代细胞阳性率应>95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞团解体(需提供物流温度记录)
- 7日内证实支原体/真菌污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏后存活率低于85%(需提供染色检测视频)
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形
- 未按悬浮细胞特性进行静置培养导致细胞丢失
- 使用含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液洗涤细胞引发聚集
- 培养容器未进行防脱落处理(如未包被BSA)
- 未定期进行密度监测导致细胞过度增殖死亡
(注:所有操作需在生物安全二级实验室中进行,废弃物按生物危险品规范处置)