一、细胞基本属性
- 细胞名称:ARPE - 19人视网膜色素上皮细胞
- 细胞别称:ARPE - 19细胞;视网膜色素上皮细胞;RPE细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
- 组织来源:视网膜色素上皮组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
- 细胞形态:典型多角形或铺路石样单层,接触抑制后呈紧密排列
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+特定生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀;培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱2小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺),37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:避免剧烈吹打(保护细胞间紧密连接结构),传代后48小时内避免频繁观察以稳定细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液;梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证:复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%);功能验证:跨膜电阻检测或特定标志物免疫荧光染色
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态照片);2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供PCR检测报告);3. 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法);4. STR鉴定与宣传不符
- 不予重发情形:1. 客户延迟复苏超过72小时;2. 使用非推荐培养基导致细胞分化异常;3. 反复冻融操作引起细胞损伤;4. 未按规范进行污染检测即开展实验