一、细胞基本属性
- 细胞名称:ACHN人肾细胞腺癌细胞
- 细胞别称:ACHN细胞;人肾腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 背景特征:源自一名22岁女性肾细胞腺癌患者的转移灶组织
- 组织来源:肾脏腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需细胞外基质支持)
- 细胞形态:上皮样,呈多角形或梭形,核质比高
- 细胞代数:推荐使用P3 - P10代(确保遗传稳定性和功能一致性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(受培养密度及传代操作影响)
- 供应限制:仅供科研用途,不可用于临床治疗、药物生产或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱2小时稳定后观察
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 避免消化过度(防止细胞膜完整性受损)
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)
- 细胞密度:建议冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖能力(P5代细胞倍增时间应≤36小时)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货3日内经检测确认支原体污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形
- 收货后未按规范储存(如未及时转入液氮或培养)
- 使用非指定培养基或添加剂导致细胞状态异常
- 未按操作手册进行传代造成污染或损伤
- 未留存原始冻存管用于争议复检