一、细胞基本属性
- 细胞名称：AAV - 293人胚肾细胞（Human Embryonic Kidney 293 Cells）
- 细胞别称：HEK - 293；293细胞；人胚肾上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 背景特征：经腺病毒5型DNA片段转化，具备高效外源基因转染与蛋白表达能力
- 组织来源：胚胎肾组织（经永生化处理）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胰酶消化传代）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈不规则多边形，融合时呈铺路石样单层
- 细胞代数：P5 - P15（确保高转染效率与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 增殖速度：倍增时间约24 - 36小时（依赖培养条件与传代密度）
- 应用限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或基因治疗产品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时恢复贴壁
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:4至1:6（推荐接种密度2×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化30秒 - 1分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 避免过度消化（影响细胞膜完整性及贴壁能力）
- 传代后12小时内避免移动培养瓶，确保贴壁稳定
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 转入液氮
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：GFP报告基因转染效率≥80%（P8代内适用）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实支原体污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏存活率＜90%（按规范操作复测）
- STR鉴定与存档数据不符
- 不予重发情形：
- 客户未按推荐条件培养（如使用非指定培养基）
- 传代次数超过推荐代数导致功能异常
- 实验操作污染（未在超净台操作或试剂污染）
- 未提供完整细胞状态证据（如照片或检测记录）
