一、细胞基本属性
- 细胞名称：A875人黑色素瘤细胞（Human Melanoma Cell Line A875）
- 细胞别称：A875细胞；人黑色素瘤细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：37岁女性（转移性黑色素瘤患者）
- 组织来源：皮肤黑色素瘤组织（转移灶）
- 生长特性：贴壁生长（偶见半悬浮态，需轻柔处理）
- 细胞形态：不规则梭形或多边形，核质比高，可见黑色素颗粒沉积
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用中低代次以维持表型稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS + 1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养密度及血清批次）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外壁后静置培养箱1小时，缓慢置换新鲜培养基
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁细胞密度过高易脱落）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化30 - 60秒，轻拍瓶壁促使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项
- 避免过度消化导致细胞膜损伤（黑色素瘤细胞易聚集）
- 传代后6 - 8小时更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后12小时检测存活率（台盼蓝染色法，存活率≥85%）
- 功能验证：CCK - 8法检测增殖活性（P8代细胞应维持对数生长期特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽或温度记录异常（需提供物流温度监控证明）
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- 复苏后活率低于85%（需提供台盼蓝染色视频记录）
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 未按规范预温培养基直接解冻细胞
- 使用非推荐血清或添加生长因子干扰实验结果
- 细胞冻存前未进行梯度降温导致冰晶损伤
- 未定期进行支原体检测造成交叉污染
（注：本产品经STR鉴定及基础功能验证，实验操作需符合生物安全二级标准）
