一、细胞基本属性
- 细胞名称：A673人横纹肌瘤细胞（Human Rhabdomyosarcoma Cell Line）
- 细胞别称：A673细胞；横纹肌肉瘤细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：胚胎性横纹肌肉瘤来源（供体筛选符合肿瘤细胞特性）
- 组织来源：横纹肌肉瘤组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞间接触及营养条件）
- 细胞形态：多形性，呈梭形或多角形，聚集成簇
- 细胞代数：P3 - P10（建议使用前验证增殖能力与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：倍增时间约24 - 48小时（依赖培养密度与血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面，静置培养箱平衡1小时再观察贴壁状态
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止
- 注意事项：
- 避免过度消化导致细胞膜损伤（镜下观察细胞间隙扩大时终止）
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min→ - 20℃ 1h→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥85%）
- 功能验证：细胞增殖实验（P5代细胞应维持稳定分裂能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 5天内证实支原体/真菌污染（需提供检测报告）
- 复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色视频）
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 未按规范进行预培养直接冻存
- 使用非推荐血清或添加剂导致细胞分化
- 未定期检测支原体引发交叉污染
- 超代次使用（P10以上）导致功能异常
