一、细胞基本属性
- 细胞名称：A549+luc人肺癌细胞（荧光素酶标记）
- 细胞别称：A549荧光素酶稳转株；A549 - Luc
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：肺癌组织（原代细胞经慢病毒转染荧光素酶基因）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞间接触抑制）
- 细胞形态：上皮样多角形，单层贴壁呈铺路石状排列
- 荧光标记：稳定表达Firefly Luciferase（需定期添加嘌呤霉素维持筛选压力）
- 细胞代数：P5 - P15（建议控制传代次数以保证荧光素酶活性稳定）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1μg/mL嘌呤霉素）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（受细胞密度及抗生素浓度影响）
- 应用范围：肿瘤机制研究、药物筛选、活体成像（需配套荧光素酶底物）
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度3×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 荧光维持：
- 培养基中持续添加1μg/mL嘌呤霉素
- 每月使用荧光素酶底物进行活性检测
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
- 冻存密度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存程序：
- 消化后离心收集高活力细胞
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期存储
- 质检标准：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 荧光素酶活性检测：RLU值需≥1×10⁶（使用IVIS系统定量）
四、售后服务承诺
- 重发条款：
- 到货干冰完全挥发导致细胞失活（需提供包装照片）
- 72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 荧光素酶活性低于标称值50%（需提供原始检测数据）
- 细胞STR分型与数据库不匹配
- 免责声明：
- 客户未按时传代导致细胞过度老化
- 擅自停用筛选抗生素导致荧光标记丢失
- 未按规范进行活体成像导致数据异常
- 使用非配套底物造成的检测偏差
