一、细胞基本属性
细胞名称:人肺腺癌细胞(Human Lung Adenocarcinoma Cells)
细胞别称:A549细胞;肺腺癌细胞系;非小细胞肺癌模型细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:58岁男性肺癌患者肺腺癌组织
生长特性:贴壁生长(适应常规培养器皿)
细胞形态:上皮样,单层铺展呈多边形
细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以保证增殖活性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:细胞冻存液(含10% DMSO+90% FBS),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 36小时(受培养密度及血清批次影响)
供应限制:科研专用,禁止临床及体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬接种
培养瓶:酒精消毒表面,直接置于CO₂培养箱
传代标准:融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:6(依据实验需求调整密度)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
室温消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
避免过度消化导致细胞膜损伤
定期检测支原体污染(建议每2月一次)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90% FBS + 10% DMSO
细胞密度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
消化后离心收集细胞,缓慢加入预冷冻存液
程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期存储
复苏验证:
存活率≥90%(台盼蓝染色法)
功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P5代细胞应保持典型生长特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度异常致细胞死亡(需提供运输温度记录)
2. 到货72小时内证实污染(需提供微生物检测结果)
3. 细胞复苏存活率<85%
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按规范进行传代导致细胞老化
2. 使用非标准培养基导致形态异常
3. 未执行定期支原体检测引发污染扩散
4. 液氮存储中断导致细胞失活