一、细胞基本属性
细胞名称
人黑色素瘤细胞(Human Melanoma Cells)
细胞别称
A2058细胞;皮肤黑色素瘤细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
皮肤恶性黑色素瘤组织
生长特性
贴壁生长(依赖细胞外基质支撑)
细胞形态
上皮样或纺锤形,可形成不规则克隆团
细胞代数
P5 - P15(确保遗传稳定性和功能性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约24 - 48小时(与培养密度及传代操作相关)
供应限制
仅限科研用途,禁止用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于培养箱中静置4小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
• 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项
• 避免消化时间过长(防止细胞膜损伤)
• 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤
• 消化离心后重悬细胞于冻存液
• 梯度降温:4℃30分钟 → - 20℃2小时 → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
• 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色法≥90%)
• 功能验证:细胞增殖实验(P8代细胞应保持活跃生长曲线)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中液氮罐泄漏或温度异常(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 复苏后存活率低于85%(经第三方检测确认)
4. STR分型与数据库信息不匹配
不予重发情形
1. 收货后超过48小时未进行复苏操作
2. 使用非指定培养基导致细胞形态异常
3. 未按梯度降温要求导致冻存失败
4. 未进行常规支原体检测即开展下游实验