一、细胞基本属性
- 细胞名称:人胶质母细胞瘤细胞(A172细胞系)
- 细胞别称:A172细胞;胶质母细胞瘤细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:胶质母细胞瘤组织
- 疾病背景:源自52岁男性患者脑胶质母细胞瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则梭形或星形,核质比高,成簇生长
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(与血清浓度相关)
- 应用范围:肿瘤机制研究、药物敏感性测试、侵袭迁移实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管复苏需37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶收货后酒精消毒表面,静置4小时再换液。
- 传代标准:融合度达80% - 90%时传代(约2 - 3天/次)
- 传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA消化液,37℃作用2 - 3分钟,显微镜下观察细胞间隙扩大后终止。
- 注意事项:消化后需轻柔吹打避免细胞碎片产生;传代后48小时内避免频繁观察扰动贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于预冷冻存液,程序降温盒分步冻存(4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存)
- 复苏验证:台盼蓝染色存活率≥90%;复苏后72小时进行CCK - 8增殖活力检测。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 到货干冰完全挥发且细胞瓶破裂(需提供开箱视频)
- 72小时内经qPCR证实支原体污染
- STR分型与数据库不匹配(需提供第三方检测报告)
- 不予重发情形:
- 未使用原代冻存液直接传代培养
- 自行更换无血清培养基导致细胞凋亡
- 未按规范进行胶原包被引发贴壁失败