一、细胞基本属性
细胞名称
人高转移肺癌细胞(95 - D Human Highly Metastatic Lung Cancer Cells)
细胞别称
95 - D细胞;高转移肺癌细胞株
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
肺组织原发癌灶(经病理学确认)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
不规则梭形或多角形,核质比高,伪足活跃
细胞代数
P15 - P25(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T75培养瓶 或1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基
RPMI - 1640(含10%FBS + 1%双抗+1%谷氨酰胺)
培养条件
气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10%DMSO及低温保护剂),液氮长期保存
增殖能力
倍增时间约24 - 36小时(受血清浓度影响)
应用限制
仅限于肿瘤转移机制研究,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱
传代标准
融合度达90% - 95%(高增殖特性需及时分瓶)
传代比例
1:3至1:5(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
0.25%胰酶 - EDTA消化2 - 3分钟,离心后完全去除消化酶
关键注意
避免细胞过度融合导致自发分化
更换培养基需预热至37℃以减少应激
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
基础培养基+20%FBS + 10%DMSO
冻存密度
5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
程序优化
梯度降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
质控指标
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:Transwell侵袭实验(P20代细胞应保持转移特性)
四、售后服务承诺
重发条件
1. 到货干冰完全挥发且细胞复苏失败(需提供包装照片)
2. 72小时内经检测证实支原体污染(需第三方报告)
3. STR位点匹配率<85%
免责条款
1. 使用非指定培养基导致增殖异常
2. 解冻后超72小时未贴壁即报损
3. 未定期进行支原体检测引发交叉污染
4. 液氮存储中断导致的细胞失活