一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肾透明细胞腺癌细胞（Renal Cell Carcinoma Cell Line）
- 细胞别称：786 - O；786 - 0；肾透明细胞癌
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：肾透明细胞癌组织（原代分离）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样多角形，胞质透亮，核仁明显
- 细胞代数：P5 - P15（建议传代不超过20代）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素+1%L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5%CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10%DMSO+90%FBS），液氮长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（与培养基成分相关）
- 供应限制：仅限肿瘤机制研究，禁止临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后离心去冻存液，预涂胶原的培养瓶接种
- 培养瓶：酒精消毒后直接置于CO₂培养箱平衡
- 传代标准：融合度达80% - 90%（每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，离心后完全去除消化液
- 注意事项：
- 传代前需预涂Ⅰ型胶原（浓度50μg/cm²）
- 避免细胞过度融合导致自发分化
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础冻存液：70%RPMI - 1640+20%FBS+10%DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后细胞悬液离心去上清
- 梯度降温程序：4℃30min→ - 80℃24h→液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行VEGF分泌检测（ELISA法）
- 定期STR鉴定确保遗传稳定性
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 到货干冰完全挥发且细胞活性＜80%
- 7日内证实支原体污染（需第三方检测报告）
- 细胞贴壁率＜70%（复苏后72小时评估）
- 基因突变位点与ATCC数据库不符
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养器皿
- 自行修改培养基血清浓度
- 未定期进行STR身份验证
- 实验操作导致特异性标记丢失
