一、细胞基本属性
- 细胞名称:人高转移鼻咽癌细胞系(5 - 8F)
- 细胞别称:5 - 8F细胞;鼻咽癌高转移细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:鼻咽癌原发肿瘤组织(经病理学确认)
- 生长特性:贴壁生长(需经胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多角形或梭形,高核质比,成簇生长
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用P8 - P12代次以保证转移特性稳定)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(高增殖活性)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒后直接置于培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐密度3×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 避免过度消化导致细胞膜损伤
- 传代后6小时内勿移动培养瓶以防悬浮
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+10% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心,重悬细胞于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮保存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色)
- 功能验证:Transwell迁移实验(P10代细胞迁移率需>对照组)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测影像)
- 细胞贴壁率<80%(复苏后48小时评估)
- STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 未按推荐密度接种导致细胞老化
- 使用非指定培养基或血清
- 未定期进行支原体检测引发污染
- 液氮保存中断超过24小时
- 注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,建议定期进行转移表型验证