一、细胞基本属性
- 细胞名称：293T人胚肾细胞
- 细胞别称：HEK 293T；293 - T；人胚肾细胞293T
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：胚胎肾组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胰酶消化传代）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈多边形，排列紧密
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，保证高转染效率及遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（高增殖活性，依赖培养密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或商业生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种于培养瓶
- 培养瓶：酒精擦拭表面后直接置于37℃培养箱，24小时后首次换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度3×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含酚红）
- 室温消化1 - 2分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞膜完整性）
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化收集细胞，离心后重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→转入液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：48小时内进行荧光素酶报告基因检测（P8代细胞应维持高转染效率）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 7天内证实支原体或细菌污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏后细胞贴壁率低于80%
- STR鉴定与标准谱系不符
- 不予重发情形：
- 未按规范使用胎牛血清（如替换为低浓度或劣质血清）
- 自行改造细胞后导致功能异常
- 未使用推荐传代比例导致增殖停滞
- 未进行常规支原体检测引发交叉污染
（注：以上内容基于科研级细胞标准操作流程，实际应用需遵循实验室生物安全规范。）
