顺乌头酸酶(Aconitase)活性测定试剂盒

三羧酸循环系列

货号

规格

检测方法

目录价

XM-F-SSS01848样紫外法询价
XM-W-SSS01896样微板法询价


一、产品简介

顺乌头酸酶(Aconitase)是一种在生物体内广泛存在的酶,参与三羧酸循环等重要代谢途径,对维持细胞的正常代谢和

能量供应起着关键作用。它催化柠檬酸与异柠檬酸之间的

可逆异构化反应,是三羧酸循环中的限速酶之一。

定义与功能:

定义:顺乌头酸酶是一种能够催化柠檬酸通过顺乌头酸中

间体转化为异柠檬酸的酶。

功能:在三羧酸循环中,顺乌头酸酶通过催化柠檬酸与异

柠檬酸的转换,保证了三羧酸循环的顺利进行,为细胞提供

能量和生物合成所需的前体物质。三羧酸循环是细胞呼吸的

核心过程,对于生物体的能量代谢和物质代谢至关重要。

催化机制:

顺乌头酸酶催化柠檬酸脱水形成顺乌头酸,然后顺乌头酸

加水形成异柠檬酸。这一反应过程依赖于酶的活性中心和

特定的催化基团,通过酸碱催化等机制促进反应的进行。

活性测定方法:

本试剂盒采用微板法测定顺乌头酸酶(Aconitase)的活性

大小。该方法通过检测反应体系中特定产物的生成或底物

的消耗,利用酶标仪在特定波长下测量吸光度的变化,

根据吸光度的变化速率来计算顺乌头酸酶的酶活性。

重要性:

顺乌头酸酶作为三羧酸循环中的关键酶,其活性和存在对

于细胞的能量代谢、物质合成以及维持细胞内环境的稳定

具有重要意义。通过催化柠檬酸与异柠檬酸的转换,顺乌

头酸酶保障了细胞的正常生理功能和生物体的生长发育。

二、所需的仪器和用品

进行顺乌头酸酶(Aconitase)活性测定实验时,需要以下

仪器和用品:

酶标仪

用途:用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。酶标

仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特

定波长下的吸光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适

的值。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结

果的准确性。

96孔板(UV板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外

光区的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并

且样品和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取顺乌头酸

酶。低温条件有助于保持顺乌头酸酶的活性,减少其在处

理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间

等),并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,

要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况

应立即停止离心。

可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够

根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重

复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校

准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品

或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。

研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在顺乌

头酸酶活性测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品,

以便提取其中的顺乌头酸酶。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保

研磨过程中样品不会受到污染。

用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变

性。在顺乌头酸酶活性测定实验中,冰可能用于冷却样品

或试剂,以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更

换以保持其低温效果。