琥珀酸脱氢酶(SDH)试剂盒

三羧酸循环系列

货号

规格

检测方法

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XM-F-SSS01348样分光法395
XM-W-SSS01396样微板法745


一、产品简介

琥珀酸脱氢酶(SDH)是一种广泛存在于生物体内的酶,在线粒体呼吸链中起着关键作用,参与细胞的能量代谢过程。

它能够催化琥珀酸氧化为延胡索酸,并将电子传递给辅酶 Q,

是三羧酸循环与呼吸链相偶联的关键酶。


定义与功能:

定义:SDH 是催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸的酶,

它与黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)紧密结合,

是线粒体呼吸链复合物 II 的重要组成部分。

功能:在细胞呼吸过程中,SDH 通过催化琥珀酸脱氢反应,

将代谢中间产物的能量转化为电子传递链中的电子,

进而参与 ATP 的合成,为细胞提供能量。

同时,它对于维持细胞内能量代谢的平衡和正常生理功能至关重要。


催化机制:

SDH 催化琥珀酸脱氢反应时,琥珀酸的两个氢原子被转移到

与其紧密结合的 FAD 上,生成还原型的 FADH₂。

FADH₂ 随后将电子传递给辅酶 Q,进入呼吸链的电子传递过程,

最终通过氧化磷酸化合成 ATP。


活性测定方法:

本试剂盒采用微板法进行 SDH 活性测定。

该方法通过在特定波长下检测反应体系中产物或底物的变化,

来计算 SDH 的酶活性大小。

具体来说,在合适的反应条件下,SDH 催化底物琥珀酸发生反应,

通过检测特定产物在相应波长下的吸光度变化,

根据吸光度与产物浓度的线性关系,间接计算出 SDH 的酶活性。


重要性:

SDH 作为线粒体呼吸链中的关键酶,其活性和存在

对于细胞的能量代谢、维持正常的生理功能具有重要意义。

SDH 活性的变化与多种生理和病理过程相关,

如细胞凋亡、肿瘤发生、代谢性疾病等。

通过准确测定 SDH 的活性,有助于深入了解细胞的能量代谢状态

和相关疾病的发病机制,为疾病的诊断和治疗提供重要的参考依据。


二、所需的仪器和用品

进行 SDH 活性测定实验时,需要以下仪器和用品:


酶标仪

用途:用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。

酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,

能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适数值。

同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。


96 孔板(UV 板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

UV 板具有透明度高、光吸收性能好的特点,

适合用于紫外光区的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,

并且样品和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取 SDH。

低温条件有助于保持 SDH 的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),

并确保离心机已预冷至适当温度。

在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,

若出现异常状况应立即停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。

可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,

确保实验的准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,

并且移液过程中要避免气泡和溅出。

在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。

在 SDH 活性测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品,

以便提取其中的 SDH。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,

并确保研磨过程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。

在 SDH 活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,

以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,

并及时更换以保持其低温效果。