一、产品简介
细胞质异柠檬酸脱氢酶（NADP - IDH）是细胞内参与能量代谢和抗氧化防御等多种生理过程的关键酶，主要存在于
细胞质中。它在三羧酸循环的变体途径中发挥重要作用，
对于维持细胞内的氧化还原平衡、调节细胞代谢和信号
传导等方面具有重要意义。
定义与功能：
定义：细胞质异柠檬酸脱氢酶（NADP - IDH）是一种以烟
酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP⁺）为辅酶，能够催化异
柠檬酸氧化脱羧生成α - 酮戊二酸和二氧化碳，并将
NADP⁺还原为NADPH的酶。
功能：在细胞代谢过程中，NADP - IDH通过催化异柠檬酸
的氧化脱羧反应，产生α - 酮戊二酸和NADPH。α - 酮戊
二酸是三羧酸循环的重要中间产物，可参与能量代谢；
NADPH则在抗氧化防御、脂肪酸和胆固醇合成等过程中
作为供氢体，维持细胞内的氧化还原稳态，保护细胞免
受氧化损伤。
催化机制：
NADP - IDH催化异柠檬酸氧化脱羧生成α - 酮戊二酸和
二氧化碳，同时将NADP⁺还原为NADPH。在这个反应中，
异柠檬酸首先被氧化成草酰琥珀酸，然后草酰琥珀酸脱
羧生成α - 酮戊二酸，反应过程中产生的电子和质子传
递给NADP⁺，使其还原为NADPH。
活性测定方法：
本试剂盒采用微板法进行NADP - IDH活性测定。在特定
的反应体系中，NADP - IDH催化异柠檬酸与NADP⁺反应
生成α - 酮戊二酸和NADPH。通过在特定波长（如340nm，
NADPH在此波长处有特征吸收峰）下检测NADPH的生成
速率，来计算NADP - IDH的酶活性大小。NADPH的生成
速率与NADP - IDH的酶活性成正比，通过测定反应体系
中NADPH的生成量，可以间接计算出NADP - IDH的酶活性。
重要性：
NADP - IDH作为细胞代谢过程中的关键酶，其活性和存在
对于维持细胞的正常生理功能、调节氧化还原平衡以及
适应内外环境变化具有重要意义。通过不断催化异柠檬酸
的氧化脱羧反应，NADP - IDH为细胞提供了重要的代谢
中间产物和还原力，保障了细胞的正常生长、发育和功能
维持。
二、所需的仪器和用品
进行NADP - IDH活性测定实验时，需要以下仪器和用品：
酶标仪
用途：用于测量NADPH在特定波长（如340nm）处的光
吸收值。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点，能够
准确测定样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到340nm。
同时，要保持孔板洁净无异物遮盖，以确保测量结果的
准确性。
96孔板（UV板）
用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。
UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点，适合用于
紫外光区的测定。
注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，并
且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取NADP - IDH。
低温条件有助于保持NADP - IDH的活性，减少其在处理
过程中的损失。
注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中，要密
切关注离心机有无异常声音等状况，若出现异常状况应
立即停止离心。
可调式移液器
用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够
根据不同的实验需求调整移液量，确保实验的准确性
和重复性。
注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其已进行校准，
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或
试剂时，要及时更换移液器头，以防止交叉污染。
研钵
用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在NADP - IDH
活性测定实验中，研钵可能用于研磨组织等样品，以便
提取其中的NADP - IDH。
注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并确保研
磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变性。
在NADP - IDH活性测定实验中，冰可能用于冷却样品或
试剂，以确保实验的准确性。
注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时更换
以保持其低温效果。
