一、产品简介
NAD - 苹果酸酶(NAD - ME)是一种在生物体内具有重要作用的酶。它参与到细胞内的多种代谢过程中,对维持细胞的正常生理功能起着关键作用。
定义与功能:
定义:NAD - 苹果酸酶是一种能够催化苹果酸脱羧生成丙酮酸、二氧化碳。
并将NAD⁺还原为NADH的酶。功能:NAD - ME在细胞内的能量代谢、物质合成等过程中发挥重要作用。
它通过催化苹果酸的脱羧反应,为细胞提供丙酮酸等代谢中间产物。
参与到三羧酸循环、糖异生等重要代谢途径中,同时产生的NADH可用于细胞呼吸链产生能量。
催化机制:
NAD - ME催化苹果酸脱羧反应,苹果酸在酶的作用下失去一个羧基生成丙酮酸。
同时将电子传递给NAD⁺使其还原为NADH。这一反应是细胞内代谢网络中的重要环节。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法测定NAD - ME的酶活性大小。在特定的反应体系中。
通过检测与反应相关的物质在特定波长下的吸光度变化来计算NAD - ME的酶活性。
重要性:
NAD - ME在生物体的代谢调控、能量平衡等方面具有重要意义。
其活性的正常维持对于细胞的正常生长、发育和功能至关重要。
对于研究生物代谢过程和相关疾病机制也具有重要价值。
二、所需的仪器和用品
进行NAD - ME活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应体系中特定物质的光吸收值。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点。
能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值,从而用于计算酶活性。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节到合适的波长。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点。
适合用于紫外光区的测定。注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染。
并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取NAD - ME。低温条件有助于保持NAD - ME的活性。
减少其在处理过程中的损失。注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等)。
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况。
若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量。
确保实验的准确性和重复性。注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准。
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头。
以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在NAD - ME活性测定实验中。
研钵可能用于研磨组织等样品,以便提取其中的NAD - ME。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在NAD - ME活性测定实验中。
冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。