柠檬酸合酶(CS)试剂盒

三羧酸循环系列

货号

规格

检测方法

目录价

XM-F-SSS00124样分光法3344
XM-W-SSS00148样微板法4864


一、产品简介

柠檬酸合酶(CS)是三羧酸循环中的关键酶,广泛存在于线粒体中。它在调节细胞代谢、能量产生以及维持细胞内环境稳定等方面起着至关重要的作用。

定义与功能:

定义:CS是一种能够催化草酰乙酸与乙酰 - CoA缩合形成柠檬酸的酶。

功能:在三羧酸循环中,CS启动循环反应,通过促进柠檬酸的生成,

维持细胞内能量代谢的正常进行,为细胞提供能量。同时,它也参与了多种物质的合成和代谢过程。

催化机制:

CS催化草酰乙酸与乙酰 - CoA发生缩合反应生成柠檬酸,这一反应是三羧酸循环的第一步,也是限速步骤。

草酰乙酸和乙酰 - CoA在CS的活性中心结合,通过一系列的化学反应形成柠檬酸。

活性测定方法:

本试剂盒采用微板法测定CS的酶活性大小。通过检测特定反应条件下底物的消耗或产物的生成量,

依据反应体系中物质的变化来间接计算CS的酶活性。

重要性:

CS作为三羧酸循环的关键酶,其活性和存在对于细胞的能量代谢、物质合成以及维持细胞的正常生理功能具有重要意义。

通过不断催化草酰乙酸与乙酰 - CoA反应生成柠檬酸,CS为细胞提供了持续的能量供应,保障了细胞的正常生长和代谢。

二、所需的仪器和用品

进行CS活性测定实验时,需要以下仪器和用品:

酶标仪

用途:用于测量反应体系中物质在特定波长下的光吸收值。

酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值,以反映CS的活性。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节到合适的波长。

同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。

96孔板(UV板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于相关反应的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取CS。

低温条件有助于保持CS的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。

在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。

可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。

可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。

在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。

研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。

在CS活性测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品,以便提取其中的CS。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。

用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。

在CS活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。