一、产品简介
γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)是生物体内参与γ-氨基丁酸(GABA)代谢的关键酶,在调节GABA水平方面发挥着重要作用。GABA是一种天然存在的非蛋白质氨基酸,
具有多种生理功能,如调节神经系统兴奋性、改善睡眠、降低血压等。
GABA-T能够催化GABA的降解,对于维持体内GABA的动态平衡至关重要。
定义与功能:
定义:GABA-T是一种能够催化GABA与α-酮戊二酸反应生成琥珀酸半醛和谷氨酸的酶。
功能:通过催化GABA的降解,GABA-T调节体内GABA的含量,从而影响神经系统的功能。
当GABA水平过高时,GABA-T促进其降解;当GABA水平过低时,其活性受到一定抑制,
以维持GABA在合适的生理范围内。这种调节作用有助于维持神经系统的稳定,
改善神经系统相关的生理状态。
催化机制:
GABA-T催化GABA与α-酮戊二酸之间的转氨反应,生成琥珀酸半醛和谷氨酸。
在这个反应过程中,GABA将氨基转移给α-酮戊二酸,形成谷氨酸,
同时自身转化为琥珀酸半醛。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行GABA-T酶活性的测定。该方法通过检测反应体系中特定产物或底物的变化,
利用酶标仪在特定波长下测量吸光度的变化来反映GABA-T的酶活性大小。
具体来说,反应体系中底物或产物在特定波长处有特征吸收峰,
其吸光度的变化速率与GABA-T的酶活性成正比。
通过测定反应体系在一定时间内吸光度的变化,可以间接计算出GABA-T的酶活性。
重要性:
GABA-T作为调节GABA代谢的关键酶,其活性和存在对于维持生物体内GABA的动态平衡、
调节神经系统功能以及相关生理过程具有重要意义。
通过催化GABA的降解,GABA-T为生物体提供了稳定的神经调节环境,
保障了神经系统的正常功能和生理状态的稳定。
二、所需的仪器和用品
进行GABA-T活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,
能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值,从而为计算GABA-T酶活性提供数据。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的数值(根据具体反应体系确定)。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,
适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取GABA-T。低温条件有助于保持GABA-T的活性,
减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。
在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,
确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。
在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在GABA-T活性测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,
以便提取其中的GABA-T。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在GABA-T活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,
以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。