一、产品简介
谷氨酸脱羧酶(GAD)是一种在生物体内发挥重要作用的酶,它能够催化谷氨酸脱羧反应,生成γ - 氨基丁酸(GABA)。
GABA是一种天然存在的非蛋白质氨基酸,具有多种生理功能,
如调节神经系统、降低血压、改善睡眠等。
定义与功能:
定义:谷氨酸脱羧酶(GAD)是一种能够催化谷氨酸脱羧生成
γ - 氨基丁酸(GABA)的酶。功能:GAD在生物体内参与GABA的合成,
GABA作为一种神经递质,在神经系统中发挥着抑制性调节作用,
有助于维持神经系统的稳定。同时,GABA还参与了能量代谢、
应激反应等生理过程。
催化机制:
GAD催化谷氨酸脱羧反应,这一反应需要磷酸吡哆醛(PLP)作为辅酶。
PLP与GAD结合,形成活性中心,促进谷氨酸的脱羧反应,
生成GABA和二氧化碳。
活性测定方法:
本谷氨酸脱羧酶(GAD)试剂盒采用微板法进行检测。
通过特定的反应体系,使GAD催化谷氨酸脱羧反应,
然后检测反应产物的生成量,从而计算出GAD的酶活性大小。
重要性:
谷氨酸脱羧酶(GAD)在生物体内的活性和存在对于维持
神经系统的正常功能、调节生理代谢以及应对外界应激等方面
具有重要意义。它的正常工作有助于保证GABA的正常合成,
从而维持生物体的生理平衡。
二、所需的仪器和用品
进行谷氨酸脱羧酶(GAD)活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。
酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品
在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的数值。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。
UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,
并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取GAD。
低温条件有助于保持GAD的活性,减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,
要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够
根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,
要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。
在GAD活性测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,
以便提取其中的GAD。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,
并确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。
在GAD活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,
以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,
并及时更换以保持其低温效果。