阿魏酸酯酶(FAE)试剂盒-405nm-显色法

细胞壁代谢

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规格

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XM-F-XXB01748样分光法1140
XM-W-XXB01796样微板法1596


一、产品简介

阿魏酸酯酶(FAE)是一种能够催化阿魏酸酯水解的酶,在农业、食品、造纸和生物能源等领域有着广泛的应用。

它可以破坏植物细胞壁中的酯键,促进细胞壁多糖的降解,

提高生物质的可利用性;在食品工业中,可用于改善面团

的流变学特性、提高面包的体积和保鲜期;还能从植物

原料中释放阿魏酸等酚酸类物质,这些物质具有抗氧化、

抗炎、抗菌等多种生物活性。


定义与功能:

定义:阿魏酸酯酶(FAE)是一类能够特异性水解阿魏酸

与多糖、木质素之间酯键的酶。

功能:FAE通过水解阿魏酸酯键,释放游离的阿魏酸,

同时破坏植物细胞壁的结构,促进多糖等大分子物质的降解,

进而提高生物质的消化率和利用率。此外,释放的阿魏酸

具有多种健康益处,可应用于食品、医药等行业。


催化机制:

FAE催化阿魏酸酯的水解反应,将阿魏酸从多糖或木质素

的酯键中释放出来。在这个过程中,酶的活性中心与底物

特异性结合,通过一系列的化学反应切断酯键,生成游离

的阿魏酸和相应的醇或多糖片段。


活性测定方法:

本试剂盒采用微板法结合405nm显色法来测定阿魏酸酯酶

(FAE)的活性。该方法基于特定的底物被FAE水解后,

产生的产物与显色剂反应,在405nm波长处有特征吸收峰,

其吸光值的变化与FAE的酶活性成正比。通过测定反应

体系在405nm处的吸光值变化,可以间接计算出FAE的

酶活性。


重要性:

阿魏酸酯酶在多个领域具有重要的应用价值。在生物技术

领域,它是实现生物质高效转化的关键酶之一,有助于推动

生物燃料和生物基化学品的生产;在食品和饲料工业中,

能够提高产品的品质和营养价值;在医药领域,释放的

阿魏酸具有潜在的治疗和保健作用。因此,准确测定FAE

的活性对于相关研究和应用具有重要意义。


二、所需的仪器和用品

进行阿魏酸酯酶(FAE)活性测定实验时,需要以下仪器

和用品:


酶标仪

用途:用于测量反应体系在405nm处的光吸收值。酶标仪

具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定

波长下的吸光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到405nm。

同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的

准确性。


96孔板

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

96孔板具有良好的均一性和密封性,适合进行微量样品的

反应和检测。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且

样品和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取和纯化

阿魏酸酯酶。低温条件有助于保持酶的活性,减少其在

处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切

关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即

停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够

根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和

重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,

并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或

试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在阿魏酸

酯酶活性测定实验中,研钵可能用于研磨植物组织等样品,

以便提取其中的阿魏酸酯酶。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保

研磨过程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。

在阿魏酸酯酶活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或

试剂,以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时

更换以保持其低温效果。