一、产品简介
外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)是参与纤维素降解过程中的重要酶类。它能够特异性地作用于纤维素分子的非还原性末端,逐步水解β - 1,4 - 糖苷键。
释放出纤维二糖等产物。在生物质转化、造纸工业、食品加工等多个领域具有广泛的应用前景。
对实现可持续发展和资源有效利用起着关键作用。
定义与功能:
定义:外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)是一种能够从纤维素链的非还原性末端依次切割β - 1,4 - 糖苷键。
生成纤维二糖的酶。
功能:在纤维素的降解过程中,CBH通过逐步水解纤维素分子,将其分解为可利用的小分子糖类。
为后续的发酵、转化等过程提供底物。在生物质能源生产中,它有助于提高纤维素的转化率。
增加生物燃料的产量;在造纸工业中,可改善纸张的性能和质量。
催化机制:
CBH结合到纤维素分子的非还原性末端,通过其活性位点与糖苷键相互作用。
利用水分子对糖苷键进行亲核攻击,使糖苷键断裂,释放出纤维二糖。
这一过程不断重复,直至纤维素分子被逐步降解。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法测定外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)的活性。
通过特定的底物与酶反应,利用酶标仪在相应波长下检测反应产物的生成量。
根据产物生成量与酶活性的关系,间接计算出CBH的酶活性大小。
重要性:
外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)作为纤维素降解过程中的关键酶。
其活性和存在对于高效利用纤维素资源、推动相关工业发展以及解决环境问题具有重要意义。
通过有效降解纤维素,CBH为实现生物质能源的可持续利用、减少对传统化石能源的依赖提供了有力支持。
同时也有助于降低生产成本,提高生产效率。
二、所需的仪器和用品
进行外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点。
能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值,从而计算出酶的活性。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适数值。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点。
适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)。
低温条件有助于保持酶的活性,减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。
在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量。
确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。
在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在CBH活性测定实验中,研钵可能用于研磨含有纤维素的样品。
以便提取其中的外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在CBH活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂。
以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。