一、产品简介
血中谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)是肝功能检测中的重要指标,它主要存在于肝细胞中。当肝细胞受损时,GPT/ALT会释放到血液中,
导致血液中该酶的含量升高。因此,检测血中GPT/ALT的水平对于诊断
肝脏疾病、评估肝脏功能具有重要意义。
定义与功能:
定义:谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)是一种能够催化
丙氨酸和α - 酮戊二酸之间氨基转移反应的酶。
功能:在肝细胞内的氨基酸代谢过程中,GPT/ALT发挥着关键作用。
它参与了氨基的转移和代谢调节,维持着细胞内氨基酸的平衡。
通过检测血液中的GPT/ALT含量,可以反映肝细胞的损伤程度和肝脏
的功能状态。
催化机制:
GPT/ALT催化丙氨酸和α - 酮戊二酸之间的氨基转移反应,生成
丙酮酸和谷氨酸。这一反应在肝细胞的代谢过程中起着重要的作用。
当肝细胞受损时,细胞膜的通透性增加,GPT/ALT会释放到血液中,
使得血液中的酶活性升高。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行血中GPT/ALT活性的测定。该方法通过
特定的反应体系,使GPT/ALT催化底物发生反应,生成具有特定
吸光度的产物。通过在特定波长下检测产物的吸光度变化,来计算
血中GPT/ALT的酶活性大小。吸光度的变化与GPT/ALT的酶活性成正比,
通过测定反应体系中吸光度的变化量,可以间接计算出GPT/ALT的酶活性。
重要性:
GPT/ALT作为反映肝脏功能的重要指标,其活性的检测对于肝脏
疾病的诊断、治疗和预后评估具有重要意义。通过检测血中GPT/ALT
的水平,可以及时发现肝细胞的损伤,为临床诊断提供重要依据。
同时,动态监测GPT/ALT的变化,有助于评估治疗效果和判断疾病
的发展趋势,对于保障患者的健康具有重要作用。
二、所需的仪器和用品
进行血中GPT/ALT活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。酶标仪具有
高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的检测波长。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板具有
透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于光度测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和
试剂的加入量要准确。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同
的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且
移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要及时
更换移液器头,以防止交叉污染。
离心机
用途:用于分离血液样品中的血清或血浆。离心过程可以使血细胞
和其他固体成分沉淀,从而得到用于检测的血清或血浆样品。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等)。在
离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常
状况应立即停止离心。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止酶的活性丧失。在血中
GPT/ALT活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验
的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持
其低温效果。