一、产品简介
溶菌酶(LYS/LZM)是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。它主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间
的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,
导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷
的病毒蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活。
因此,溶菌酶具有抗菌、消炎、抗病毒等多种作用。
定义与功能:
定义:溶菌酶是一种能水解细菌细胞壁中黏多糖的酶。
功能:溶菌酶能够破坏细菌的细胞壁结构,导致细菌裂解死亡,
发挥抗菌作用;同时它还能参与机体的免疫调节和炎症反应的调控,
起到消炎作用;并且可与病毒蛋白结合使病毒失活,具有抗病毒功能。
催化机制:
溶菌酶特异性地作用于细菌细胞壁中肽聚糖的β-1,4糖苷键,
催化其水解,从而使细胞壁结构被破坏,细菌失去细胞壁的保护而死亡。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行溶菌酶活性的测定。通过在特定条件下,
利用溶菌酶对底物的作用,检测相关产物或反应的变化来计算溶菌酶
的活性大小。具体可能是通过检测底物被水解后产生的产物的量
或反应体系的某些物理化学性质的变化来间接反映溶菌酶的活性。
重要性:
溶菌酶在生物体内的免疫防御、维持内环境稳定等方面发挥着重要作用。
在食品工业中,它可作为天然防腐剂;在医药领域,可用于治疗多种
感染性疾病和炎症。本试剂盒为准确检测溶菌酶的活性提供了有效的工具,
对于相关研究和应用具有重要意义。
二、所需的仪器和用品
进行溶菌酶活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量微板法反应体系中相关产物或反应变化所对应的光
吸收值等参数。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定
样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节到合适的波长。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于利用微板法进行高通量测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂
的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取溶菌酶。低温条件
有助于保持溶菌酶的活性,减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注离心机
有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同
的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,
要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在溶菌酶活性测定
实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,以便提取其中的溶菌酶。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中
样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。
在溶菌酶活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验
的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其
低温效果。