一、产品简介
苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物体内苯丙烷类代谢途径的关键酶,
在植物的生长、发育以及对生物和非生物胁迫的响应中发挥着重要作用。
它主要催化苯丙氨酸脱氨生成反式 - 肉桂酸,是植物次生代谢过程中的一个重要反应步骤。
定义与功能:
定义:PAL 是一种能够催化 L - 苯丙氨酸脱氨生成反式 - 肉桂酸和氨的酶。
功能:在植物体内,PAL 通过催化苯丙氨酸的脱氨反应,参与多种次生代谢物的合成,
如木质素、黄酮类化合物、植保素等。这些次生代谢物在植物的防御反应、色素形成、
信号传导等过程中具有重要作用,帮助植物抵抗病原菌入侵、适应环境胁迫以及维持正常的生长发育。
催化机制:
PAL 催化 L - 苯丙氨酸脱去氨基,生成反式 - 肉桂酸和氨。这一反应是苯丙烷类代谢途径的起始步骤,
为后续多种次生代谢物的合成提供了重要的前体物质。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行 PAL 酶活性的测定。该方法通过检测反应体系中特定产物的生成量或底物的减少量,
结合相应的检测技术(如分光光度法等)来计算 PAL 的酶活性大小。
微板法具有高通量、操作简便、灵敏度较高等优点,能够快速准确地测定多个样品中的 PAL 酶活性。
重要性:
PAL 作为苯丙烷类代谢途径的关键酶,其活性和表达水平的变化与植物的生长、发育和抗逆性密切相关。
通过调节 PAL 的活性,植物可以适应不同的环境条件,增强对病虫害、干旱、高温等胁迫的抵抗能力。
因此,准确测定 PAL 的酶活性对于研究植物的生理生化过程、提高作物的抗逆性和品质具有重要意义。
二、所需的仪器和用品
进行 PAL 活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应体系中特定物质在特定波长下的光吸收值,从而计算 PAL 的酶活性。
酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节到合适的波长。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,
以确保测量结果的准确性。
96 孔板(UV 板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV 板具有透明度高、光吸收性能好的特点,
适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取 PAL。低温条件有助于保持 PAL 的活性,
减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。
在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,
确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。
在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在 PAL 活性测定实验中,研钵可能用于研磨植物组织等样品,
以便提取其中的 PAL。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在 PAL 活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,
以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。