一、产品简介
总巯基(TTs)是生物体内一类含有巯基(-SH)的化合物,在维持细胞内氧化还原平衡、参与生物催化反应、解毒等生理过程中,
发挥着至关重要的作用。巯基具有较强的还原性,
能够与许多氧化物质发生反应,保护细胞免受氧化损伤。
定义与功能:
定义:总巯基(TTs)是指生物样品中所有含巯基的化合物的总和,
包括小分子巯基化合物(如谷胱甘肽等)和蛋白质上的巯基。
功能:在细胞内,总巯基参与抗氧化防御体系,
清除自由基和过氧化物,维持细胞内的氧化还原稳态;
同时在一些酶促反应中作为辅酶或底物,参与生物合成和代谢过程。
检测机制:
本试剂盒采用微板法进行总巯基(TTs)的检测。
微板法基于特定的化学反应,使巯基与显色剂发生反应,
生成具有特征吸收峰的产物。通过检测该产物在特定波长下的吸光度,
根据吸光度与总巯基含量的线性关系,计算出样品中总巯基的含量。
检测方法:
本试剂盒通过微板法,在特定波长下检测反应产物的吸光度,
来计算总巯基(TTs)的含量。反应产物在特定波长处有特征吸收峰,
其吸光度与总巯基的含量成正比。通过测定反应体系中产物的吸光度,
可以间接计算出样品中总巯基的含量。
重要性:
总巯基(TTs)的含量变化反映了细胞内氧化还原状态的改变,
与多种生理和病理过程密切相关。检测总巯基的含量有助于了解,
生物体的抗氧化能力、评估氧化应激水平以及诊断和监测某些疾病,
的发生和发展。
二、所需的仪器和用品
进行总巯基(TTs)含量检测实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应产物在特定波长处的光吸收值。
酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品,
在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到特定波长。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。
UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,
并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取含巯基的物质。
低温条件有助于保持巯基化合物的稳定性,减少其在处理过程中的,
氧化损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,
要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止,
离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据,
不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,
要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。
在总巯基含量检测实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,
以便提取其中的巯基化合物。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,
并确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止巯基化合物发生氧化,
或降解。在总巯基含量检测实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,
以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,
并及时更换以保持其低温效果。