一、产品简介
总抗氧化能力(T - AOC)是反映机体抗氧化防御体系功能的综合指标,
在动物体内,抗氧化系统对于维持细胞内环境稳定、抵御氧化应激损伤,
起着至关重要的作用。它能够清除体内过多的自由基,防止自由基对,
细胞膜、蛋白质和核酸等生物大分子的损伤,从而保护细胞的正常结构,
和功能。
定义与功能:
定义:总抗氧化能力(T - AOC)试剂盒(ABTS法) - 动物样本是一种,
用于检测动物样本中总抗氧化能力的试剂盒,采用微板法进行检测。
该方法利用ABTS(2,2'-联氮 - 二(3 - 乙基苯并噻唑 - 6 - 磺酸)),
在过氧化物酶和过氧化氢的作用下生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTS• +,
当样本中存在抗氧化物质时,会与ABTS• +发生反应,使溶液颜色变浅,
通过检测吸光度的变化来测定样本的总抗氧化能力。
功能:本试剂盒通过检测动物样本(如血清、血浆、组织匀浆等)中,
的总抗氧化能力,能够评估动物机体的抗氧化水平,为研究动物的,
氧化应激状态、疾病发生机制以及营养干预效果等提供重要的参考,
依据。它可以帮助科研人员了解动物体内抗氧化防御体系的功能,
状态,判断动物是否受到氧化损伤以及氧化应激的程度。
反应机制:
在微板法的检测过程中,首先将ABTS与过氧化物酶和过氧化氢混合,
生成ABTS• +阳离子自由基,该自由基在特定波长下有特征吸收峰。
当加入含有抗氧化物质的动物样本后,样本中的抗氧化成分(如,
维生素C、维生素E、谷胱甘肽等)会与ABTS• +发生反应,使ABTS• +,
得到电子而被还原,溶液的颜色逐渐变浅,其吸光度也随之降低。
吸光度的降低程度与样本中抗氧化物质的含量成正比,通过与标准,
曲线比较,就可以计算出样本的总抗氧化能力。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行测定。将样本和标准品分别加入到96孔板,
的相应孔中,然后加入ABTS• +工作液,充分混匀后,在特定的,
反应时间内,使用酶标仪在相应波长下检测各孔的吸光度值。
根据标准品的吸光度绘制标准曲线,再根据样本的吸光度值从标准,
曲线上查得对应的总抗氧化能力值。
重要性:
总抗氧化能力反映了动物体内抗氧化防御体系的整体功能。检测,
动物样本的总抗氧化能力对于研究动物的健康状况、疾病的发生,
发展机制以及营养物质的作用效果具有重要意义。在动物养殖,
过程中,氧化应激可能会导致动物生长性能下降、免疫力降低、,
疾病易感性增加等问题。通过使用本试剂盒检测动物的总抗氧化,
能力,可以及时发现动物体内的氧化应激状态,采取相应的措施,
进行干预,如调整饲料配方、添加抗氧化剂等,以提高动物的生产,
性能和健康水平。同时,对于研究动物疾病的发病机制和治疗方法,
也具有重要的参考价值。
二、所需的仪器和用品
进行总抗氧化能力(T - AOC)检测实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。酶标仪,
具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下,
的吸光度值,从而计算出样本的总抗氧化能力。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到检测所需的,
特定波长。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果,
的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板,
具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品,
和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,如制备组织匀浆时,
需要通过低温离心去除组织碎片等杂质,提取含有抗氧化物质的,
上清液。低温条件有助于保持样本中抗氧化物质的活性,减少其,
在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注,
离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据,
不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,
要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨动物组织样本,使其达到实验所需的粒度,便于,
提取其中的抗氧化物质。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨,
过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止样本中的抗氧化物质,
发生降解或变性。在实验过程中,冰可能用于冷却样品或试剂,
以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以,
保持其低温效果。