线粒体呼吸链复合体I/NADH-辅酶Q还原酶试剂盒

一、产品简介

线粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原酶是呼吸链的重要组成部分，

在线粒体能量代谢过程中发挥着关键作用。它主要存在于真核细胞的

线粒体内膜上，负责催化NADH的氧化和辅酶Q的还原反应，在细胞

呼吸和ATP合成过程中起着至关重要的作用。

定义与功能：

定义：线粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原酶是一种能够催化

NADH将电子传递给辅酶Q，同时将质子从线粒体基质跨内膜泵到膜

间隙的酶复合物。

功能：在线粒体呼吸链中，该复合体通过催化NADH的氧化和辅酶Q

的还原，建立跨内膜的质子电化学梯度，为ATP的合成提供驱动力。

同时，它参与细胞内的氧化还原反应，维持细胞内的能量平衡和代

谢稳定。

催化机制：

线粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原酶催化NADH的氧化和辅酶

Q的还原反应。NADH作为电子供体，将电子传递给复合体I中的黄素

单核苷酸（FMN），然后经过一系列铁 - 硫中心，最终传递给辅酶Q，

使其还原为泛醌醇。在电子传递过程中，复合体I将质子从线粒体基

质泵到膜间隙，形成跨内膜的质子电化学梯度。

活性测定方法：

本试剂盒采用微板法测定线粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原

酶的活性。通过检测特定波长下辅酶Q还原产物的生成速率来计算酶

的活性大小。辅酶Q还原产物在某一特定波长处有特征吸收峰，其生

成速率与线粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原酶的活性成正比。

通过测定反应体系中辅酶Q还原产物的生成量，可以间接计算出该酶

的活性。

重要性：

线粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原酶作为线粒体呼吸链的关

键组成部分，其活性和存在对于细胞的能量代谢、呼吸功能以及维

持细胞的正常生理功能具有重要意义。通过不断催化NADH的氧化和

辅酶Q的还原，该复合体为细胞提供了持续的能量供应，保障了细胞

的正常生长和发育。同时，其功能异常与多种疾病的发生发展密切

相关，如神经退行性疾病、心血管疾病等。

二、所需的仪器和用品

进行线粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原酶活性测定实验时，

需要以下仪器和用品：

酶标仪

用途：用于测量辅酶Q还原产物在特定波长下的光吸收值。酶标仪

具有高精度和高灵敏度的特点，能够准确测定样品在特定波长下的

吸光度值。

注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到特定波长。同

时，要保持孔板洁净无异物遮盖，以确保测量结果的准确性。

96孔板（UV板）

用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。UV板具有

透明度高、光吸收性能好的特点，适合用于紫外光区的测定。

注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，并且样品和

试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取线粒体呼吸链复合

体I/NADH - 辅酶Q还原酶。低温条件有助于保持酶的活性，减少其

在处理过程中的损失。

注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），并

确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中，要密切关注离心机

有无异常声音等状况，若出现异常状况应立即停止离心。

可调式移液器

用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同

的实验需求调整移液量，确保实验的准确性和重复性。

注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其已进行校准，并且

移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时，要及时

更换移液器头，以防止交叉污染。

研钵

用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在该酶活性测定

实验中，研钵可能用于研磨细胞或组织等样品，以便提取其中的线

粒体呼吸链复合体I/NADH - 辅酶Q还原酶。

注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并确保研磨过程

中样品不会受到污染。

冰

用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变性。在该

酶活性测定实验中，冰可能用于冷却样品或试剂，以确保实验的准

确性。

注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时更换以保持

其低温效果。