Na+k+—ATP酶试剂盒

呼吸与能量代测

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XM-F-HX00824样分光法289
XM-W-HX00848样微板法486


一、产品简介

Na⁺+K⁺—ATP酶,又称钠钾泵,是一种镶嵌在细胞膜脂质双分子层中的特异蛋白质。它广泛存在于各种细胞的细胞膜上,对维持细胞内低钠高钾的离子环境起着至关重要的作用。

定义与功能:

定义:Na⁺+K⁺—ATP酶是一种能够水解ATP释放能量,同时逆浓度梯度将细胞内的Na⁺泵出细胞外。

将细胞外的K⁺泵入细胞内的酶。

功能:通过主动运输维持细胞内低钠高钾的离子环境,这对于细胞的渗透压平衡。

生物电活动以及物质的吸收和分泌等生理过程具有重要意义。

催化机制:

Na⁺+K⁺—ATP酶在细胞内结合3个Na⁺后,催化ATP水解,使自身磷酸化并发生构象变化。

将Na⁺释放到细胞外;然后在细胞外结合2个K⁺,使自身去磷酸化并恢复原来的构象。

将K⁺转运到细胞内。

活性测定方法:

本试剂盒采用微板法进行检测,通过特定的反应体系和检测手段来计算Na⁺+K⁺—ATP酶的活性大小。

在反应体系中,Na⁺+K⁺—ATP酶催化ATP水解,通过检测水解产物的生成量。

可以间接计算出Na⁺+K⁺—ATP酶的活性。

重要性:

Na⁺+K⁺—ATP酶作为维持细胞离子平衡的关键酶,其活性和存在对于细胞的正常生理功能。

以及整个生物体的健康具有重要意义。通过维持细胞内低钠高钾的离子环境。

Na⁺+K⁺—ATP酶为细胞的各种生理活动提供了必要的条件,保障了细胞和生物体的正常生长和发育。

二、所需的仪器和用品

进行Na⁺+K⁺—ATP酶活性测定实验时,需要以下仪器和用品:

酶标仪

用途:用于测量反应体系中特定产物在特定波长下的光吸收值。

酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的检测波长。

同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。

96孔板(UV板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取Na⁺+K⁺—ATP酶。

低温条件有助于保持Na⁺+K⁺—ATP酶的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等)。

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况。

若出现异常状况应立即停止离心。

可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量。

确保实验的准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准。

并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头。

以防止交叉污染。

研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。

在Na⁺+K⁺—ATP酶活性测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品。

以便提取其中的Na⁺+K⁺—ATP酶。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。

用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。

在Na⁺+K⁺—ATP酶活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂。

以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。