NADH氧化酶(NOX)试剂盒

呼吸与能量代测

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XM-F-HX00548样分光法669
XM-W-HX00596样微板法1292


一、产品简介

NADH氧化酶(NOX)是一种在生物体内参与氧化还原反应的重要酶。它在细胞的能量代谢、抗氧化防御等过程中发挥着关键作用。


定义与功能:

定义:NADH氧化酶是能够催化还原型辅酶Ⅰ(NADH)氧化生成氧化型辅酶Ⅰ(NAD⁺)的酶。

功能:在细胞能量代谢过程中,NOX通过催化NADH氧化,促进电子传递和质子跨膜运输,参与ATP的合成。

同时,它还参与细胞内的抗氧化防御体系,调节细胞内的氧化还原状态,保护细胞免受氧化应激的损伤。


催化机制:

NOX催化NADH氧化生成NAD⁺,这一反应涉及电子的传递和质子的转移。

在反应过程中,NADH将电子传递给NOX的辅基,经过一系列的中间反应,最终将电子传递给氧分子,生成水。

同时,质子从细胞内转移到细胞外,形成跨膜质子梯度,驱动ATP的合成。


活性测定方法:

本试剂盒采用微板法测定NADH氧化酶的活性。通过在特定波长下检测NADH的氧化速率来计算NOX的酶活性大小。

NADH在特定波长处有特征吸收峰,其氧化速率与NOX的酶活性成正比。通过测定反应体系中NADH的吸光度变化,可以间接计算出NOX的酶活性。


重要性:

NADH氧化酶作为细胞能量代谢和抗氧化防御体系中的关键酶,其活性和存在对于维持细胞的正常生理功能、促进生物体的生长和发育具有重要意义。

通过不断催化NADH氧化,NOX为细胞提供了持续的能量供应,保障了细胞的正常代谢和功能。


二、所需的仪器和用品

进行NADH氧化酶活性测定实验时,需要以下仪器和用品:


酶标仪

用途:用于测量NADH在特定波长处的光吸收值。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到特定值。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。


96孔板(UV板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取NOX。低温条件有助于保持NOX的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在NOX活性测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,以便提取其中的NOX。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在NOX活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。