6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)试剂盒(可见显色法)

磷酸戊糖途径

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XM-F-LS00248样分光法1094
XM-W-LS00296样微板法1900


一、产品简介

6 - 磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)是生物体内一种重要的酶,广泛存在于多种细胞中,参与磷酸戊糖途径等重要代谢过程,

对维持细胞内的抗氧化防御系统、提供生物合成所需的还原力,

(如 NADPH)等起着至关重要的作用。

定义与功能:

定义:6 - 磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)是一种能够催化,

6 - 磷酸葡萄糖脱氢生成 6 - 磷酸葡萄糖酸内酯,并同时,

将 NADP⁺还原为 NADPH 的酶。

功能:在细胞代谢中,G6PDH 主要参与磷酸戊糖途径,

通过催化反应产生的 NADPH 是细胞内许多生物合成反应,

的重要辅酶,如脂肪酸、胆固醇等的合成。同时,NADPH,

还在维持细胞内的抗氧化防御系统中发挥关键作用,

保护细胞免受氧化损伤。

催化机制:

G6PDH 催化 6 - 磷酸葡萄糖脱氢,将氢原子转移给 NADP⁺,

使其还原为 NADPH,同时 6 - 磷酸葡萄糖转化为 6 - 磷酸,

葡萄糖酸内酯,这一反应是磷酸戊糖途径的起始步骤,

在细胞代谢中具有重要意义。

活性测定方法:

本试剂盒采用微板法(可见显色法)测定 6 - 磷酸葡萄糖,

脱氢酶(G6PDH)的活性。通过特定的可见显色反应,

使反应产物呈现特定颜色,在特定波长下检测吸光度的变化,

吸光度的变化速率与 G6PDH 的酶活性成正比。

通过测定反应体系中吸光度的变化,可以间接计算出,

G6PDH 的酶活性。

重要性:

G6PDH 作为磷酸戊糖途径的关键酶,其活性和存在对于,

细胞的正常代谢、抗氧化防御以及生物合成等生理过程,

具有重要意义。通过不断催化 6 - 磷酸葡萄糖的脱氢反应,

G6PDH 为细胞提供了持续的 NADPH 供应,保障了细胞的,

正常生长和功能维持。

二、所需的仪器和用品

进行 G6PDH 活性测定实验时,需要以下仪器和用品:

酶标仪

用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。

酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定,

样品在特定波长下的吸光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到,

合适的检测波长。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,

以确保测量结果的准确性。

96 孔板

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

96 孔板具有规格统一、操作方便的特点,适合用于,

批量样品的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,

并且样品和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取 G6PDH。

低温条件有助于保持 G6PDH 的活性,减少其在处理过程,

中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,

要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况,

应立即停止离心。

可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够,

根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性,

和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,

并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品,

或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。

研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。

在 G6PDH 活性测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织,

等样品,以便提取其中的 G6PDH。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保,

研磨过程中样品不会受到污染。

用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。

在 G6PDH 活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,

以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换,

以保持其低温效果。