大鼠褪黑素(MT)ELISA

一、产品基本属性

产品名称：大鼠褪黑素(MT)ELISA 

规格：48T/96T

检测原理：

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附法（ELISA），专门设计用于体外定量检测大鼠血清、血浆、脑脊液、组织提取物或其他相关生物样本中的MT水平。实验过程中，酶标板预包被有特异性

抗MT抗体，与样本中的MT及标准品中的MT竞争结合有限的抗体结合位点。经过洗涤去除未结合成分后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗，与抗体-抗原复合物结合。

加入显色底物，在辣根过氧化物酶的作用下发生颜色反应，颜色深浅与样本中MT的浓度成反比。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中MT的浓度。

反应类型：竞争法

反应时间：约3.5-4.5小时

反应性：高度特异，针对大鼠MT

检测方法：比色法

灵敏度：能够检测到低于试剂盒提供的最低浓度标准品的MT

样本体积：50-100μL（根据具体实验设计调整）

样本类型：血清、血浆、脑脊液、组织提取物或其他相关生物样本

特异性：与其他相关肽类无明显交叉反应

重复性：板内及板间变异系数均小于10%

二、样品处理与活化方法

血清/血浆：直接取用或按一定比例稀释后使用，无需额外活化步骤。

脑脊液：离心去除杂质后，直接取用或按一定比例稀释后使用。

组织提取物：取适量组织，加入适量的样本稀释液进行匀浆处理，并确保样本中的MT浓度在检测范围内。

三、精密度与回收率

精密度：

通过低、中、高浓度样本的批内及批间变异系数评估，均小于10%，确保结果的稳定性和可靠性。

回收率：

在血清、血浆、脑脊液、组织提取物等样本中添加已知浓度的MT标准品，回收率范围及平均回收率如下表所示，且在不同稀释度下表现出良好的线性回收特性。（具体数值需参照实际测试结果）

四、试剂盒组成及保存

48孔配置：

说明书1份

封板膜2片

密封袋1个

酶标包被板1×48

CGRP标准品0.5ml×6管

酶标试剂3ml×1瓶

样品稀释液5ml×1瓶

显色剂A液3ml×1瓶

显色剂B液3ml×1瓶

终止液2ml×1瓶

20×浓缩洗涤液20ml×1瓶

96孔配置：

同上，但各组分数量加倍

保存条件：

按说明书指示保存于2-8℃，避免反复冻融和直接光照。

五、试剂盒性能

灵敏度：能够检测到低于最低浓度标准品的MT水平。

特异性：与其他相关肽类无交叉反应，确保结果的准确性。

重复性：变异系数低，保证实验结果的稳定性和可靠性。

六、注意事项

使用前请确保所有试剂恢复至室温并充分混匀。

严格按照操作步骤进行实验，避免交叉污染。

试剂瓶盖需紧密封闭，以防蒸发和污染。

试剂体积以实际发货版说明书为准，分装时可能略有盈余。

七、操作步骤

准备：将所需试剂和样本恢复至室温，并准备好实验所需的设备和耗材。

标准品加样：在标准品孔中加入不同浓度的MT标准品溶液。

样本加样：在样本孔中加入待测样本溶液。

加酶：向所有孔中加入适量的酶标试剂。

温育：用封板膜封住酶标板，置于37℃恒温箱中温育。

洗涤：轻轻揭去封板膜，弃去孔内液体，用洗涤液洗涤5次，拍干。

显色：向每孔中加入显色剂A和B，避光显色。

终止：显色结束后，向每孔中加入终止液终止反应。

测定：在450nm波长下测定各孔的OD值。

八、试验所需自备物品

酶标仪（450nm波长滤光片）

高精度移液器及吸头

37℃恒温箱

双蒸水或去离子水

吸水纸

离心机（用于处理脑脊液和组织提取物）

九、结果判断与分析

根据OD值绘制标准曲线，确保曲线的R²值大于0.99。

通过样本的OD值在标准曲线上查找对应的MT浓度。